醫(yi)院感(gan)染(ran)消毒滅(mie)菌效果監測標準及(ji)方法(fa)
根據(ju)2002年版《消毒技術規(gui)范》的(de)要求，現(xian)將我(wo)院消毒滅菌效果監測、環境微生學監測的(de)采樣(yang)方(fang)法、結果判定(ding)、質(zhi)控標準等規(gui)范如下：
環(huan)境衛生學監(jian)測：包(bao)括空(kong)氣、物體(ti)(ti)表面、醫務人員(yuan)手的(de)監測
采樣(yang)及(ji)檢(jian)查原則：采樣(yang)應具有一定(ding)數量和代(dai)表性，采樣(yang)后**盡快對樣(yang)品(pin)按(an)要求指(zhi)標(biao)進行檢(jian)測，送檢(jian)時間不得﹥6小(xiao)時(shi)，若樣品(pin)保存在冰箱內送檢(jian)時(shi)間不得﹥24小時。
醫院室內空氣的消毒
I 類環境：包括(kuo)層流潔凈手術(shu)室和(he)層流潔凈病房，要(yao)求空氣中的細(xi)菌總數(shu)≤10 cfu/m3。
II 類(lei)環境(jing)：包括普(pu)通手術(shu)室、產(chan)房(fang)、嬰兒(er)室、早產(chan)兒(er)室、普(pu)通保(bao)護(hu)性隔離室、供應室潔凈區、燒(shao)傷病(bing)房(fang)、重癥監護(hu)病(bing)房(fang)。要求空氣中的(de)細(xi)菌總數≤200 cfu/m3。
III類環(huan)境：包括兒科(ke)(ke)病房、婦產科(ke)(ke)檢查室(shi)、注射室(shi)、換藥室(shi)、室(shi)、供應室(shi)清潔區、急(ji)診室(shi)、化驗室(shi)、各類普(pu)通病室(shi)和房間(jian)，要求空氣中的細菌總數≤500 cfu/m3。
1、 采樣時(shi)間：消毒處理后(hou)，操(cao)作前進行采樣。
2、采樣方法：平板暴露法
（1）布點方(fang)法：室內面積(ji)≤30 m2;，設內(nei)、中、外對角線3點，內外兩點距墻1米；室內(nei)面積＞30 m2，設東(dong)、西(xi)、南、北4角及中央5點，其中東、西、南(nan)、北(bei)均(jun)距墻1米。
（2）采樣方法：將(jiang)直徑為(wei)9cm普通營養瓊(qiong)脂平板放在室內各采樣(yang)點處，采樣(yang)高度為距地(di)面1.5米(mi)，采(cai)樣(yang)時將平板蓋打(da)開，扣(kou)放(fang)于平板旁，暴露5分鐘，蓋好立即送檢。
3、計(ji)算公(gong)式：
空氣細菌(jun)菌(jun)落總數（cfu/ m3）=50000N∕（A × T）
式中(zhong)A為平板(ban)面積（cm2）；T為平(ping)板(ban)暴露時間（min）；N為平均菌落數（cfu）。平板面積(ji)：半徑2× π （π即3.14） 那么(me)此公式(shi)可(ke)以(yi)簡(jian)化為N×157。
4、注意事項：采樣前，關好門(men)、窗，在(zai)無人走(zou)動的情況(kuang)下，靜止10min 進行采樣(yang)。
5、質控標準（結果判定）：
Ⅰ類區域：細菌總數≤10cfu∕m3 (或0.2cfu/平(ping)板)，未檢出金黃色葡(pu)萄球菌、溶血(xue)性(xing)鏈球菌為消毒(du)合格；
Ⅱ類(lei)區域(yu)：細菌總數(shu)≤200cfu∕m3 (或4cfu/平板(ban))，未(wei)檢出金(jin)黃色葡萄球菌(jun)、溶(rong)血性(xing)鏈球菌(jun)為消(xiao)毒(du)合格；
Ⅲ類區域：細菌(jun)總數(shu)≤500cfu∕m3 (或(huo)10cfu/平(ping)板)，未檢出金(jin)黃色(se)葡萄球菌(jun)、溶(rong)血性(xing)鏈(lian)球菌(jun)為消毒合(he)格(ge)。
物(wu)體和(he)環(huan)境(jing)表面消毒
I 類環(huan)境：包括層流潔凈(jing)手術室和(he)層流潔凈(jing)病(bing)房。
II 類環境：包括(kuo)普通手術室(shi)、產房(fang)、嬰兒室(shi)、早(zao)產兒室(shi)、普通保護(hu)性隔離室(shi)、供應室(shi)潔凈(jing)區、燒傷病房(fang)、重癥監護(hu)病房(fang)。
I、II類環(huan)境要(yao)求物體(ti)(ti)表面(mian)的細菌總數(shu)≤5 cfu/cm2。
III類環(huan)境：包括兒(er)科(ke)病房、婦(fu)產科(ke)檢查(cha)室、注射室、換藥室、室、供應室清潔(jie)區、急診室、化驗室、各類普通病室和房間，要求空氣中的細(xi)菌總數(shu)≤10 cfu/cm2。
IV類環(huan)境：包括(kuo)傳染(ran)病科及病房。要(yao)求(qiu)物體表面細菌總(zong)數≤15 cfu/cm2。
1、采樣時間:在消毒處(chu)理后進行采樣(yang)。（或是(shi)在滅菌處理后，存放有效期內采樣）
2、采(cai)樣面積：被(bei)采表(biao)面＜100/ cm2，取(qu)全部表面；被采表面>100 cm2，取100 cm2。小(xiao)型物(wu)體(ti)(ti)表面的結果計算，用cfu/件表示。
3、采樣(yang)方法(fa)：
① 壓印采(cai)樣法：采(cai)用一直徑(jing)為5.6 cm（面積約為25 cm2）的消毒塑料專用(yong)平(ping)皿，傾注營養瓊脂培養基(ji)，并使(shi)培養基(ji)高出平皿邊緣1-2mm,凝固后置4℃冰箱保存待用。采樣時將平皿上的瓊脂表面直接壓貼在被檢物體表面10-20秒后送檢。
置37℃培養箱培養24-48小時，計算并鑒定細菌。
②用(yong)5cm×5cm的(de)標(biao)準滅菌規格板(ban)，放在被檢物體表(biao)面(mian)，采樣(yang)面(mian)積>100 cm2，連續(xu)采樣4個，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子1支，在規格板內橫豎往返均勻涂擦各5次，并隨之轉動棉拭子，剪去手接觸部位，將棉拭子投入10 ml含相應中(zhong)和劑的無菌洗脫液試(shi)管內(nei)，立即送檢。門把(ba)手等不規(gui)則物體表面(mian)用(yong)棉拭子(zi)直接涂擦(ca)采(cai)樣。
4、采樣結(jie)果計算方(fang)法：
物體表面細菌 平皿上菌落平均數 ×采樣液稀(xi)釋倍數(shu)
菌(jun)落總數(cfu/cm2)＝─────────────────
采樣面積(cm2)
采(cai)樣(yang)液稀釋倍(bei)數為10：（棉拭子投入10 ml含(han)相(xiang)應中和劑的無菌洗脫液試管內）
5、質控(kong)標準：
Ⅰ、Ⅱ類區(qu)域：細菌總數≤5cfu∕cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。
Ⅲ類區域細菌：總數≤10cfu∕cm2，并(bing)未(wei)檢出(chu)致病菌為消毒合格。
Ⅳ類(lei)區域細菌：總數(shu)≤15cfu∕cm2，并未(wei)檢出致病菌(jun)為(wei)消(xiao)毒合格。
母嬰同室、早產兒室、嬰兒室、 新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門氏菌。
手和皮膚(fu)黏膜消毒：
1、采(cai)樣時(shi)間：在接觸病人和從事(shi)醫療活動前進行采樣或消(xiao)毒后立即采樣。
2、采樣(yang)面積及方法：
（1）手的采(cai)樣:被檢(jian)人五指(zhi)并攏，用浸有含相應(ying)中和劑的無(wu)菌洗脫液的棉拭(shi)子(zi)在雙手指(zhi)屈面從指(zhi)根到(dao)指(zhi)端往(wang)返(fan)涂擦 2 次(一(yi)只手涂擦面積(ji)約 30 cm2)，并(bing)轉動(dong)采樣棉拭子(zi)，剪去操作(zuo)者手接觸部位，將棉拭子(zi)投入 10ml 含相(xiang)應中和劑的(de)無菌(jun)洗脫液(ye)試管內，立即送檢。
（2）皮膚粘膜采樣：用5cm×5cm的標準(zhun)滅菌(jun)規格板，放(fang)在被檢皮膚處，用浸有含相應(ying)中和劑的無菌(jun)洗(xi)脫(tuo)液(ye)的棉拭子1支，在規格板內橫豎往返均勻涂擦各5次，并隨之轉動棉拭子，剪去手接觸部位后，將棉拭子投入10 ml含相應中和劑的無菌洗(xi)脫液的試管內，立(li)即送檢。不規(gui)則的粘膜(mo)皮(pi)膚處可用棉拭子直接(jie)涂擦采樣。若表面不足5cm×5cm，可用(yong)相應面積的規格(ge)板采樣。
3、檢測方法：將采樣管在混勻器上振蕩20s或(huo)用力振打80次，用無菌吸管吸取1ml待檢樣品(pin)接種(zhong)于滅菌平皿，每(mei)一(yi)樣本接種(zhong)2個平(ping)皿，內加入已(yi)溶化的45℃～48℃的營養(yang)瓊脂15ml～18ml，邊(bian)傾注(zhu)邊(bian)搖勻，待瓊脂凝固，置36℃±1℃溫箱(xiang)培(pei)養48h，計數菌落數。
4、采樣結果計(ji)算方(fang)法：
; 平板上(shang)菌落的平均數 ×采(cai)樣液 稀釋倍數
細菌總數(cfu/ cm2) ＝ ─────────────────────────
采樣面積(cm2)
其中(zhong)采樣面積即為30×2。
5、質控標準：
Ⅰ、Ⅱ類區(qu)域(yu)工(gong)作人員：細菌總數(shu)≤5cfu∕cm2，并未檢(jian)出(chu)金(jin)黃(huang)色葡萄球菌(jun)、大腸桿(gan)菌(jun)、銅綠(lv)假單孢菌(jun)為消毒合格。
Ⅲ類區域(yu)工(gong)作(zuo)人員：細菌總數(shu)≤10cfu∕cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。
Ⅳ類區(qu)域(yu)工(gong)作人員(yuan)：細菌(jun)總數≤15cfu∕cm2，并(bing)未檢出金黃色葡(pu)萄球菌、大腸桿菌為消毒合格(ge)。
母嬰(ying)同(tong)室、嬰(ying)兒(er)室、新生(sheng)兒(er)室及兒(er)科(ke)病房的工(gong)作人員手上(shang)，不(bu)得檢出沙門(men)氏菌(jun)、大腸桿菌(jun)、溶血性鏈球菌(jun)、金黃色葡(pu)萄(tao)球菌(jun)為(wei)消(xiao)毒(du)合格。
皮膚粘(zhan)膜：參照手的衛生(sheng)學標準執行。
醫療用品衛生標準：
1、 進入(ru)人體(ti)無菌(jun)組織、器官或接(jie)觸(chu)破損皮膚、粘膜的醫療用品**無菌(jun)。
2、 接觸(chu)粘(zhan)膜的醫療用品，細(xi)菌菌落總數(shu)應≤20cfu∕g或100 cm2，致病性微生物不得檢出(chu)。
3、 接觸皮膚的(de)醫(yi)療(liao)用品(pin)，細(xi)菌菌落總數應≤200cfu∕g或100 cm2，致(zhi)病性(xing)微(wei)生物不(bu)得(de)檢出。
使用中消毒劑與無(wu)菌器(qi)械保存液衛生標準：
1、 使用中消毒劑：細(xi)菌菌落總數應≤100cfu∕ml，致病性微生物不得(de)檢(jian)出。
2、 無(wu)菌(jun)(jun)器(qi)械保存液(ye)：**無(wu)菌(jun)(jun)。
